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X线照射后肺癌细胞肿瘤坏死因子mRNA的表达
目的探讨X线诱导和调节肺癌细胞株NCI-H596和A549肿瘤坏死因子(TNF-α) mRNA的表达作用及其临床意义.方法应用实时荧光定量RT-PCR技术,定量检测 NCI-H596和A549细胞株照射前和接受不同剂量(2, 5, 10, 20, 30和40 Gy)的X线照射后,以及受照30 Gy后不同时间TNF-α mRNA的表达.同时进行集落形成试验,检测NCI-H596 和A549细胞株的放射敏感性.结果集落形成试验结果显示,未照射的NCI-H596 细胞株集落形成率为0.12～0.24; A549细胞株集落形成率为0.37～0.45.照射后,A549 细胞的存活分数(SF)在2 Gy时为47.3%±9.0%,4 Gy 时为18.0%±3.0%,6 Gy时为6.0%±2.0%,8 Gy时为1.4%±0.3%;NCI-H596细胞的SF在2 Gy时为55.2%±51.0%,4 Gy时为15.9%±9.2%,6 Gy时为3.5%±1.7%;8 Gy 时为0.9%±0.6%;二者SF差异无统计学意义,二者的D0值和Dq值差异亦无统计学意义(P>0.05).实时荧光定量RT- PCR检测显示,NCI-H596 细胞受照后TNF-α mRNA表达逐渐升高,照射剂量达40 Gy时,TNF-α mRNA表达水平达高峰,为对照组的83倍;受照后,1 h TNF-α mRNA表达逐渐升高,6 h达高峰,为对照组的568倍.A549 细胞受照后,1 h TNF-α mRNA表达即达高峰,为对照组的136倍.结论 X线可诱导肺癌细胞株A549和 NCI-H596产生 TNF-α,且呈剂量、时间依赖性,可提高肺癌放射治疗的疗效,也可对正常组织和患者的一般状况产生影响.
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人非小细胞肺癌细胞受照射后肿瘤坏死因子水平的变化
目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549和NCI-H596受X射线照射后肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA表达及其蛋白水平的变化.方法应用实时荧光RT-PCR技术,观察肺癌细胞系A549和NCI-H596照射2、5、10、20、30和40Gy后1、3、6、12、24、48和72 h TNF-α mRNA表达及其蛋白水平.应用免疫组织化学法(ELISA)检测相应培养液中TNF-α蛋白的水平.同时进行集落形成实验观察2种细胞系的放射敏感性.结果X射线照射后TNF-αmRNA表达及其蛋白水平较照射前升高,吸收剂量达40 Gy时TNF-α mRNA表达水平达高峰,为对照组的83倍.NCI-H596细胞受照射后1h TNF-α mRNA表达逐渐升高,6 h达高峰,为对照组的568倍.NCI-H596细胞受照射后TNF-α蛋白水平逐渐升高,受照射后24 h达高峰(为基础水平的58倍).且与受照射剂量有关.A549细胞受照射后1 h TNF-α mRNA表达仅见瞬间升高,随后即降至基础水平.而且,A549细胞受照射后TNF-α蛋白水平无明显升高.结论X射线可诱导NSCLC细胞系NCI-H596产生TNF-α,呈现时间、剂量依赖性改变.
