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乳腺癌细胞株MDA-MB-231获得性放疗抵抗机制探讨
目的 探讨乳腺癌细胞株MDA-MB-231产生获得性放疗抵抗的可能机制.方法 采用CCK8及流式细胞术检测产生乳腺癌细胞株MDA-MB-231获得放疗抵抗能力后细胞增殖及细胞周期的变化,采用蛋白质印迹法检测放疗抵抗后相关信号通路蛋白的变化,初步探讨乳腺癌细胞产生放疗抵抗的可能机制.结果 CCK8法检测结果显示,第1天实验组吸光度值为0.305 7±0.013 1,明显高于对照组的0.277 8±0.011 8,差异无统计学意义,F=7.571,P=0.051;第2天实验组为0.401 7±0.048 0,明显高于对照组的0.289 0±0.020 9,差异有统计学意义,F=13.907,P=0.020;第4天实验组为0.635 7±0.026 1,明显高于对照组的0.434 2±0.080 6,差异有统计学意义,F=16.994,P=0.015;第6天实验组为1.5347±0.0391,显著高于对照组的1.075 7±0.036 8,差异有统计学意义,F=218.953,P＜0.001.提示231/RR10细胞株在获得放疗抵抗能力的同时,增殖能力也增强,差异有统计学意义,P＜0.05.流式细胞术检测结果显示,放疗抵抗细胞株中,G0～G1及S期的细胞比例减少,但差异无统计学意义,P值分别为0.083和0.165;Gz～M期的细胞比例明显增加,差异有统计学意义,P值分别为0.002和＜0.01.蛋白质印迹法检测结果显示,抑癌基因PTEN的表达明显减少,表皮生长因子的活化状态pEGFR的表达明显增加,AKT蛋白的表达水平无变化,而AKT磷酸化蛋白的表达明显增加.结论 乳腺癌细胞株MDA-MB-231中EGFR/AKT信号通路激活,促进细胞生长和生存,从而导致放疗抵抗的产生.这一信号通路可能由抑癌基因PTEN负性调控.
关键词： 乳腺癌 放疗抵抗 PTEN EGFR/AKT信号通路 细胞周期 -
MicroRNA-93在宫颈癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响
目的 探讨microRNA-93(miR-93)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响.方法 收集2014年1月-2014年7月中南大学湘雅医院有完整病历资料的41例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中miR-93表达水平;采用脂质体转染法将miR-93模拟片段(mimic)转染入宫颈癌Hela细胞,恢复细胞内miR-93表达;活细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测miR-93对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot检测Hela细胞中上皮生长因子受体(EGFR)及其下游蛋白的表达量变化.结果 41例宫颈癌患者肿瘤组织中miR-93表达量(0.048±0.013)低于癌旁组织(0.113±0.025),差异有统计学意义(P=0.026);转染miR-93模拟片段后,宫颈癌Hela细胞中miR-93表达恢复;与对照组和空白组比较,实验组宫颈癌细胞增殖能力下降(P =0.004),早期凋亡比例增加(P =0.032),侵袭(P=0.003)和迁移能力下降(P=0.003);过表达miR-93的Hela细胞EGFR及下游的p-AKT表达下降(P=0.005),而总AKT蛋白无明显变化(P =0.372).结论 miR-93在宫颈癌组织中的表达量下降,恢复其在宫颈癌细胞中的表达能够明显抑制其细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制部分与miR-93抑制宫颈癌细胞EGFR/AKT信号通路活性有关.
关键词： 宫颈癌 microRNA-93 EGFR/AKT信号通路 生物学行为
