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原癌基因蛋白质类c-fos文献资料
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不同剂量甲状旁腺素氨基端1-34片段连续刺激对SaoS-2人成骨肉瘤细胞系的影响
目的观察不同剂量人甲状旁腺素氨基端1-34片段(hPTH1-34)连续刺激对SaoS-2人成骨肉瘤细胞系功能、信号传导的影响及机制.方法对于对数生长期的SaoS-2细胞,采用5、50、500和5 000 μg/L浓度hPTH1-34连续刺激8 d.于刺激前、刺激中及刺激后,采用"金氏"化学法和放射免疫法测定培养液中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)浓度;采用竞争蛋白结合法测定环磷酸腺苷(cAMP)浓度;采用逆转录(RT)-PCR对c-fos基因表达水平进行半定量分析.结果 500 μg/L hPTH1-34刺激显著增高ALP水平(P＜0.05 ,比对照组),促进成骨细胞分化.5 000 μg/L刺激组BGP水平逐渐下降(P值均<0.05,比对照组和刺激前).50、500 μg/L hPTH1-34连续刺激组cAMP明显增高(P值均<0.05).5 μg/L和5 000 μg/L组cAMP无显著改变.50、500 μg/L组c-fos基因表达水平高于其他组.结论 hPTH1-34对成骨样细胞的影响与剂量显著相关,50及500 μg/L hPTH1-34连续刺激显著促进成骨样细胞分化,增加骨骼的合成代谢.ALP、cAMP的水平及c-fos基因表达对不同浓度hPTH1-34刺激的反应明显同步,提示hPTH1-34主要通过蛋白激酶A信号途径影响成骨细胞功能及c-fos基因的表达,后者进一步在转录水平调节成骨细胞功能.
