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青-链霉素文献资料
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高浓度青-链霉素诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化
目的 研究青-链霉素(双抗)对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)向心肌细胞分化的影响.方法 采用常规悬滴法培养mESC形成拟胚体(embryonic body,EB),在分化培养基中加入不同浓度的双抗(1.0％、5.0％和10.0％)培养贴壁的EB,选择不同的时间点分化的细胞通过流式细胞术(FCM)、细胞免疫荧光、western blotting等分析心肌特异性蛋白表达水平的差异.结果 小鼠多能干细胞表面标志物SSEA-1表达呈阳性(绿色),H.E染色显示核质比＞＞1.正常自分化细胞免疫荧光显示cTnT、MLC2阳性(绿色),肌节清晰可见.高浓度双抗组,cTnT+阳性细胞率高于对照组和低浓度(1.0％)双抗组,western blotting显示其心肌特异性蛋白cTnT、cTnI、MLC2、connexin43等表达增加(p＜0.05).结论 高浓度双抗促进mESCs向心肌细胞分化,且有浓度依赖性.
