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脱氧核糖核酸酶Ⅰ在急性冠状动脉综合征诊断中的应用
目前有大量的研究表明急性冠状动脉综合征(acute cor-onary syndrome,ACS)与炎症反应及粥样斑块的不稳定破裂有密切关系,而细胞凋亡在其中亦起着重要作用,脱氧核糖核酸酶I(deoxyribonuclease Ⅰ,DNase Ⅰ)是细胞凋亡中双链DNA降解过程中起着重要作用的核酸酶,可能直接参与了ACS的发生和发展过程.
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孕妇血样采集后体外存放对血浆中胎儿游离DNA水平的影响
目的:探讨孕妇血样采集后体外存放过程中血浆游离DNA水平的影响因素.方法:采集孕妇血样,体外4℃存放6、36 h后,实时定量PCR检测孕妇外周游离DNA水平,AnnexinⅤ/PI双染色法流式分析血样白细胞死亡情况,速率法检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)活性,单相酶扩散法测定血浆DNA酶活性.结果:血样体外存放36 h后,血浆中β-globin基因的拷贝数较存放6 h的样品显著增加,而SRY基因拷贝数明显减少;4℃存放条件下,妊娠晚期孕妇外周血中胎儿DNA占总DNA百分比从6 h的(10.3±5.6)%下降到36 h的(3.0±2.1)%,差异有统计学意义(P<0.05).体外存放6 h的血样中基本未检出死亡细胞,而存放36 h的血样中分别检出了坏死和凋亡的白细胞;36 h样品血浆中LDH活性较6 h样品显著升高(P<0.05).单相酶扩散法结果表明,血浆DNA酶在4℃时虽然活性显著减弱,但仍然保持降解DNA的能力.结论:血样采集后体外存放时间过长会导致血浆总游离DNA增多,而胎儿DNA减少,这种变化可能与血样体外存放过程中白细胞死亡和血浆DNA酶对胎儿DNA的降解作用有关;胎儿DNA抽提应在血样采集后尽早(6 h内)进行.