您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
流式细胞术鉴定文献资料
-
全骨髓贴壁改良法分离培养人骨髓间充质干细胞及标记鉴定
目的 对比、探求分离培养人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的方法,探讨hMSCs鉴定和标记的方法,为进一步的实验研究打下基础.方法 采集成人健康志愿者骨髓5mL,全骨髓贴壁法、全骨髓贴壁改良法、密度梯度离心法分离纯化、培养和扩增,获得hMSCs,对比三种方法.“慢冻速融”的原则进行细胞冻存、复苏.流式细胞术检测hMSCs的表面标志.hMSCs经5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)标记,免疫细胞化学法测定并评估.结果 hMSCs运用三种方法均可获得,比较全骨髓贴壁改良培养法为方便高效分离获取hMSC、体外扩增迅速.流式细胞仪检测结果显示:CD44阳性及CD71弱阳性,表达率分别为95.05％,78.86％；CD34、CD45阴性,表达率分别为3.40％,2.88％.Brdu佳标记浓度和时间分别为10μmol/L和72 h.结论 hMSCs采取全骨髓贴壁改良法进行较好的纯化和扩增,Brdu标记可用于hMSCs的生长和分化的动态示踪观察.有望建立hMSCs库,为组织工程、细胞移植研究打好基础.
