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  • 抗原表位定向选择的人源抗TNF-αFab的鉴定

    作者:王卓智;王琰;李竞;刘群英;化冰;陈宇萍;朱迎春;李振甫;董志伟

    目的 对通过抗原表位定向选择技术(EGS)所筛选到的2株人源化TNF-α抗体Fab段进行分析鉴定. 方法 测定可变区基因的序列, 用亲本鼠单抗Z8进行竞争ELISA,用L929细胞检测其体外中和TNF-α的活性,并用硫氰酸铵洗脱法比较与亲本鼠单抗的亲和力. 结果 基因测序表明2株抗体VH相同, 属人VHⅠ亚群;Vκ分别属人VκⅠ、VκⅢ亚群;竞争抑制实验表明所获人源抗体片段与亲本鼠源抗体是针对TNF-α的同一抗原表位; 体外中和实验证明此抗体片段能中和TNF-α对L929细胞的毒性; 该抗体片段的亲和力略低于原鼠单抗Z8. 结论 用EGS方法获得的人源抗体片段基本保持了原鼠单克隆抗体Z8的特性.

  • 固相多肽合成法基本原理及其在抗体制备中的应用

    作者:王仁;杨向东;盛树力

    抗体是研究蛋白质和检测基因表达的一个常用的工具,而用固相合成多肽的抗体制备技术正倍受关注.本文综述了固相多肽合成法的基本原理、实验过程、在抗体制备中的应用及与基因工程抗体制备术的比较,分析并展望了今后的发展趋势.

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