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  • SARS冠状病毒spike基因DNA疫苗的初步研究

    作者:李疆;覃海德;刘鹏;张经纬;冯炳健;冯启胜;陈丽珍;潘志刚;黄丽惜;张如华;余杏娟;曾益新

    目的构建SARS病毒spike基因片段真核表达质粒DNA疫苗;检测spike基因片段的免疫原性;筛选SARS病毒疫苗构建的理想靶抗原. 方法采用RT-PCR从SARS冠状病毒北京01(BJ01)株cDNA获取了spike基因cDNA的全长D12、编码N末端氨基酸的cDNA片段D14和编码C末端氨基酸的cDNA片段D23;构建重组真核表达质粒pcDNA3/D12、pcDNA3/D14、pcDNA3/D23;用3种重组质粒和pcDNA3空质粒载体(对照)DNA皮下注射免疫Wistar大鼠;ELISA检测免疫后大鼠血清S蛋白特异性抗体IgG的产生;同位素51Cr实验检测特异性CTL应答;ELISPOT检测单细胞水平IFN-γ分泌. 结果 pcDNA3/D23疫苗免疫组大鼠血清有S蛋白阳性抗体IgG产生、抗体滴度>1000;脾淋巴细胞可诱导特异的CTL应答和IFN-γ分泌,pcDNA3/D23疫苗组与其它组之间统计分析P<0.05. 结论SARS冠状病毒S蛋白的C末端具有较强的免疫原性,是疫苗构建的理想候选靶抗原,本研究结果为SARS病毒的疫苗研究提供了资料.

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