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双歧杆菌的完整肽聚糖对大鼠腹腔巨噬细胞NF-κB的调控
双歧杆菌定植于人体肠道内,对维持肠道的微生态平衡和人体的健康起重要作用.完整肽聚糖(whole peptidoglycan,WPG)是双歧杆菌细胞壁中的多糖,能激活巨噬细胞,增强其吞噬能力,提高其能量代谢水平以及细胞毒功能.此外,WPG也能促使巨噬细胞分泌多量的IL-1、IL-6、IL-12、IL-18、TNF-α和NO.本文以Westem blot和凝胶迁移电动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测了分叉双歧杆菌的WPG对大鼠腹腔巨噬细胞PKC、IκBα和NF-κB的影响,旨在探讨WPG激活巨噬细胞的信号途径.
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紫外交联实验筛选HCV RNA结合蛋白的应用
目的选择一种用于筛选与丙型肝炎病毒(HCV)RNA核心区结合的细胞蛋白质分子较佳方法.方法用体外转录的方法制备地高辛标记(DIG)-HCV RNA;从HepG2细胞中提取细胞蛋白质分子.分别用紫外交联实验(UV)和凝胶迁移实验(EMSA)筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子.结果 2种实验方法均可检测到细胞蛋白质分子与HCV RNA结合,但凝胶迁移实验结果所见DIG-RNA信号比较弥散,而紫外交联实验的结果可见比较清晰的RNA-结合蛋白条带.结论紫外交联实验是用于筛选HCV-RNA结合蛋白的首选方案.