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diptericin基因文献资料
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全长家蝇抗菌肽基因diptericin的克隆及生物信息学分析
目的 克隆新的家蝇抗菌肽基因双翅肽(diptericin)的全长序列并对其进行相关生物信息学分析.方法 根据本实验室已经克隆的家蝇抗菌肽基因diptericin片段设计1对引物,运用cDNA末端快速扩增技术(GeneRacer)、T-A克隆和序列测定,将所得序列与GenBank中已知的diptericin基因进行同源性分析.结果 成功地从免疫诱导的3龄幼虫中得到一个全长433 bp的基因cDNA,该全长cDNA具有完整的编码框,编码99个氨基酸,相关生物信息学分析结果表明,其与厩蜇蝇diptericinA基因的同源性高,为77%.结论 初步推断此全长cDNA是家蝇抗菌肽的一个新基因,可能广泛存在于蝇类昆虫中,为进一步研究其生物活性奠定基础.
关键词： 家蝇抗菌肽 diptericin基因 快速扩增技术 生物信息学分析 -
家蝇抗菌肽diptericin基因的组织表达研究
目的 运用原位杂交方法检测家蝇抗菌肽基因dipericin组织表达模式.方法 基于前期实时荧光定量PCR的结果,选取病原诱导12h后的家蝇三龄幼虫,提取其RNA,克隆出dipericin保守序列,应用地高辛标记的diptericin基因反义RNA探针,对经多重耐药的大肠杆菌和耐甲氧西林葡萄球菌混合液刺激前后的家蝇幼虫组织切片进行组织原位杂交.结果 diptericin基因在诱导和未诱导家蝇幼虫的体壁和肌肉均未表达,在诱导后的脂肪体及中肠有高表达,在未诱导的家蝇幼虫部分组织内也有检测到阳性信号,如气管有很弱的表达,而马氏管则诱导与未诱导均有表达.结论 家蝇抗菌肽基因diptericin在家蝇抵御外界微生物感染免疫防御中,有着极其重要的作用.
关键词： 家蝇 diptericin基因 原位杂交技术
