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GGDEF-EAL文献资料
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铜绿假单胞菌PAO1中4个具有GGDEF-EAL结构域基因的研究
目的 对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)野生型PAO1中与环鸟苷二磷酸(C-di-GMP)代谢相关的4个具有GGDEF-EAL结构域基因(PA0285、PA0575、PA5295、PA5442)进行初步研究. 方法 分析4个基因的转座子突变菌株进行生物膜(Biofilm)及泳动性(Motility);利用PCR对4个基因的催化结构域进行克隆并构建原核表达载体,经IPTG诱导后检测重组蛋白的表达情况. 结果 生物膜分析显示,PA0285、PA0575、PA5442的转座子突变体较野生型PAO1间生物膜合成发生变化,其A值差异有统计学意义(P=0.000,P＜0.05);PA5295转座子突变体与PAO1间生物膜合成差异无统计学意义(P=0.232,P＞0.05);泳动性分析显示,PA0285、PA0575、PA5442的转座子突变体菌落直径与PAO1比较差异有统计学意义(P=0.000,P＜0.05),PA5295的转座子突变体与PAO1间比较差异无统计学意义(P=0.083,P＞0.05).4个基因的催化结构域原核表达载体构建成功,并在大肠埃希菌中表达目的蛋白.结论 初步分析表明PA0285、PA0575、PA5442均影响细菌的生物膜合成及运动性,为4基因的功能研究奠定了基础.
