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约氏疟原虫动合子的体外纯培养
目的探讨提纯的约氏疟原虫合子培养形成动合子的方法. 方法经黄尿酸刺激体外诱导感染鼠血中的约氏疟原虫雌雄配子形成、受精,采用梯度离心法分离得到纯净的合子,并在MEM培养基中培养. 结果从10～15只感染小鼠血液可分离到106数量级的约氏疟原虫合子;在22℃条件下,经22 h～24 h培养有动合子形成. 结论可以直接从感染鼠血诱导形成并分离到约氏疟原虫合子,所得合子经培养可发育为动合子.
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恶性疟原虫动合子表面蛋白单链抗体与按蚊Cecropin A融合基因的构建、原核表达及生物活性的初步评价
目的 构建、原核表达恶性疟原虫动合子表面蛋白单链抗体与按蚊Cecropin A 融合基因并对其表达产物的生物学活性进行评价.方法 根据按蚊对编码同种氨基酸不同密码子的偏嗜性,对鼠源性恶性疟原虫动合子表面蛋白单链抗体4B7编码基因进行改造,并与按蚊抗菌肽Cecropin A基因融合;将融合基因Cep&m4B7克隆入原核表达载体pET32a(+)并在大肠埃希菌中进行表达;对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析,体外抑菌试验鉴定表达蛋白的抑菌活性. 结果 构建了融合基因Cep&m4B7和重组表达质粒pET32a(+)-Cep&m4B7,融合基因在大肠埃希菌中以包涵体形式高效表达融合蛋白,Western blot显示重组蛋白能被抗6-His抗体识别;琼脂糖扩散法显示纯化后的目的 蛋白无抑菌活性. 结论 成功构建了融合基因Cep&m4B7,该基因在大肠埃希菌中高效表达,表达产物纯化后无体外抑菌活性.
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抗蚊中肠抗体对斯氏按蚊体内约氏疟原虫卵囊发育的影响
[目的]研究抗斯氏按蚊中肠抗体对约氏疟原虫蚊期的抑制作用.[方法]在感染血中加入抗蚊中肠抗体,羊膜饲蚊,在蚊虫血餐后14 h、9和12 d,分别检查蚊虫中肠动合子、卵囊及唾液腺中子孢子;并观察抗体浓度和蚊虫血餐抗体次数对卵囊的抑制作用.[结果]抗蚊中肠抗体可降低蚊体内卵囊的感染率和子孢子的进腺率,尚可降低动合子的感染度和卵囊指数(P＜0.05):且抗体浓度越高、蚊虫血餐抗体次数越多,卵囊数量越少.[结论]抗蚊中肠抗体对疟原虫的动合子、卵囊发育有抑制作用,但对卵囊的抑制作用明显,抗体的浓度高和维持时间长,抑制作用越明显.
