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Western bloting文献资料
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弓形虫速殖子细胞质、细胞膜、排泄-分泌抗原蛋白分子测定及特异性免疫反应的试验分析
目的研究弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分,主要蛋白分子的抗原性和用于血清学诊断的价值.方法用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析弓形虫速殖子各类抗原的蛋白组分和主要蛋白分子,用免疫印渍技术以弓形虫患者血清识别弓形虫各类抗原的免疫反应靶位.结果弓形虫速殖子细胞质抗原、细胞膜抗原和分泌代谢抗原的主要蛋白分子分别为85、52、38 ku;48、35、16、14 ku和158、95、27、15、13 ku及弓形虫患者特异性血清识别速殖子各类抗原的免疫反应靶位分别是32、40和27 ku.结论弓形虫速殖子各类抗原间存在各自独特的抗原决定簇和可被特异性记忆抗体识别的免疫反应受体.此对于提高弓形虫感染的免疫学诊断及免疫学预防均具有一定的实用价值.
关键词： 弓形虫 抗原 SDS-PAGE Western bloting -
腭裂相关基因TTF-2转基因小鼠载体的构建及体外表达
目的 扩增及克隆C57BI/6j小鼠titf-2基因并利用小鼠骨髓间充质细胞进行表达.方法 从C57BL/6j小鼠肝脏组织中提取基因组DNA,用PCR从中扩增出titf-2基因片段.将titf-2基因片段插入载体pMD18-T中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pBROAD3-mcs中,构建重组表达载体pBROAD3-mcs-titf-2,并转染小鼠骨髓间充质细胞进行表达.用羊抗鼠TTF-2多抗IgC对表达产物进行Western Blot签定.结果 DNA测序结果证实,获得titf-2基因片段,大小与理论值相符；Western Blot分析表明,表达出TTF-2约为4.2KDa大小的蛋白.结论 成功扩增、克隆titf-2基因,并在小鼠骨髓间充质细胞中得到表达,为下一步建立titf-2转基因小鼠模型奠定了基础.
关键词： TTF-2 克隆 Western bloting
