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微线体蛋白8文献资料
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重组刚地弓形虫MIC8CTD蛋白及其多克隆抗体的制备
目的 制备弓形虫微线体蛋白8羧基端胞质尾( MIC8 CTD)重组蛋白及其多克隆抗体.方法 以弓形虫基因组为模板,PCR扩增MIC8 CTD基因片段,构建MIC8 CTD/pGEX-4T-1原核表达系统；IPTG诱导表达GST-MIC8CTD融合蛋白；用纯化的融合蛋白加免疫佐剂免疫新西兰兔,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的特异性及效价.结果 构建了 MIC8 CTD原核表达系统,表达并纯化了GST-MIC8 CTD融合蛋白；获得了抗该蛋白的兔源性抗血清,纯化后的多克隆抗体能特异识别MIC8 CTD,ELISA测定抗体效价为1∶8 000.结论 制备的GST-MIC8 CTD融合蛋白具有免疫原性,用该抗原免疫动物可获得高效价的多克降抗体.
