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裂殖子表面蛋白-1基因文献资料
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间日疟原虫MSP1 C端编码基因的克隆及序列分析
目的克隆间日疟原虫MSP1 C端编码基因,并进行序列测定和分析. 方法根据间日疟原虫MSP1 C端编码基因设计1对引物,采用PCR技术从深圳间日疟患者血样(编号为PvSZ1)的核酸提取物中扩增出MSP1 C端编码基因,回收纯化后,与T载体连接构建重组子pMD/MSP1,并转化大肠杆菌JM109.阳性克隆以限制性酶切分析与PCR法鉴定后,双脱氧链末端终止法双向测定序列并分析. 结果从间日疟血样提取的DNA中扩增出1 119 bp的基因片段,所构建的pMD/MSP1阳性克隆重组子经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致.所测定的间日疟原虫PvSZ1 C端基因序列与国外Sal-1株比较,碱基数相同,未发现碱基缺失,相同的核苷酸占96.7%,序列中第542位碱基变化为同义突变(GTC→GTT,均编码缬氨酸),第375～542区间的碱基变化数占整个序列变化碱基总数的92.9%(34/37).所推测的氨基酸序列与Sal-1株比较,同源性为92.5%. 结论成功克隆了间日疟原虫PvSZ1株 MSP1 C端编码基因,该基因在不同间日疟原虫地理株间相对保守,所克隆基因序列的第375～542核苷酸区域为高频变化区.
关键词： 疟原虫 间日 裂殖子表面蛋白-1基因 分子克隆 序列分析
