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培养胚胎神经干细胞移植入纹状体后的形态学观察
本研究的目的是:将体外培养的小鼠胚胎大脑皮层和脊髓的神经干细胞经单细胞悬液微移植后观察其在大鼠纹状体的存活、迁移和分化的状况.实验在无血清条件下将这些细胞扩增、培养再经活细胞荧光染料DiI标记后,采用微移植的方法,通过脑立体定位仪上用微玻璃针将干细胞分别植入成年大鼠双侧纹状体的对称部位.大鼠存活8周后,经灌注固定、恒冷箱切片,在荧光显微镜下观察标记的移植细胞的迁移状况;用星形胶质细胞特异性抗体观察移植区GFAP的表达,以显示移植细胞分化状况.结果表明:来源于胚胎小鼠大脑皮层和脊髓的体外培养神经干细胞经微移植后,均可在成年大鼠脑内纹状体区域存活,移植的神经干细胞可向周围的脑实质内迁移,迁移细胞沿特定的纹状体结构分布.神经干细胞主要分化成星形胶质细胞.本实验结果提示,移植的神经干细胞可在脑实质内存活、迁移和分化.
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DiI 在已固定人胚胎周围神经的示踪研究
目的：观察荧光标记物 DiI 在已固定的人胚胎周围神经中的示踪显影，探讨 DiI 在周围神经示踪中的应用可行性。方法利用人胚胎新鲜标本（非疾病死亡的引产胎儿），胎龄＞20 w，经升主动脉灌注10％福尔马林进行固定，并浸泡于固定液8～10 d 后，将微量的 DiI 结晶分别植入人胚胎标本三叉神经的眼神经、上颌神经、下颌神经及三叉神经根中，放入固定液在37℃恒温箱内贮存3个月，经冰冻切片，置荧光显微镜下观察评价示踪效果。结果DiI 注入眼神经、上颌神经及下颌神经中后，可在三叉神经节内观察到许多逆行标记的神经节细胞和纤维，且细胞及细胞突起显示较好；DiI 注入三叉神经根中后，三叉神经节内也可见许多顺行标记的神经节细胞和纤维，细胞及细胞突起也显示较好。结论DiI 是一种良好的荧光类双向神经示踪剂，用于已固定人胚胎周围神经束路的失踪研究是可行的。
