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人巨细胞病毒DNA疫苗免疫效果的初步研究
人巨细胞病毒(HCMV)是广泛感染人类的重要病原体之一,在人群中有较高的感染率,胎儿、婴儿、器官移植及免疫缺陷者等更易感染.现有的抗HCMV药物治疗及被动免疫由于毒性大、价格昂贵及短效性等原因,应用大受限制,为此研制安全、有效的疫苗即成为防治HCMV疾病的重要手段.HCMV具有潜在的致癌作用,不宜发展活疫苗或含完整病毒DNA的死疫苗;亚单位疫苗虽然比较安全,但所用抗原不能在宿主细胞内表达,只能诱导体液免疫,这对于胞内感染的HCMV预防效果较差;通过新佐剂的应用,虽可引发细胞免疫,但免疫原性较差,且成本较高.因此,目前倾向于研制具有免疫原性的HCMV DNA疫苗.
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HCMV融合表达载体免疫效果的初步研究
目的 探讨含人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)AD169株gB680糖蛋白基因和突变的pp65基质蛋白基因(pp65m)DNA疫苗(pVAX1/gB680+pp65m)的免疫效果.方法 重组质粒pVAX1/gB680+pp65m转染COS-7细胞,用RT-PCR法和Western blot法检测瞬时表达产物;经碱裂解法大量提取质粒pVAX1/gB680+pp65m,经Sepharose 4FF柱层析纯化后免疫BALB/c小鼠(SPF),并通过ELISA法和脾淋巴细胞转化实验检测小鼠的体液免疫和细胞免疫应答效果. 结果 重组质粒pVAX1/gB680+pp65m能够在真核细胞中表达,表达蛋白的分子质量单位约为124 ku,且能被抗HCMV血清识别.用该重组质粒第2次免疫后第3 d受试小鼠开始产生抗HCMV抗体,第2次免疫后第8周,淋巴细胞转化试验SI值为1.951±0.112,对照组为1.095±0.060,差异有统计学意义. 结论 含HCMV AD169株gB680糖蛋白基因和突变pp65蛋白基因的DNA疫苗能诱导BALB/c小鼠产生一定强度的体液免疫和细胞免疫应答.
