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牛膝醇提物离子导入治疗膝骨关节炎（肝肾亏虚）的临床观察
目的：观察牛膝醇提物离子导入治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法：采用随机对照研究方式，将93例单膝骨性关节炎患者分为治疗组和对照组，其中治疗组以牛膝醇提物离子导入治疗，对照组以直流电常规治疗进行对比。结果：两组患者治疗后 VAS 评分、WOMAC 评分与治疗前比较均有下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组能更有效的降低疼痛程度及改善关节活动功能。结论：牛膝醇提物离子导入治疗肝肾亏虚型膝骨关节炎疗效显著，值得临床推广应用。
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CCK－8法检测牛膝醇提物诱导兔骨髓间充质干细胞佳检测条件的实验研究
目的：研究CCK－8法检测牛膝醇提物诱导兔骨髓间充质干细胞（ BMSCs）佳检测条件。方法：以兔BMSCs分离、培养及扩增，经多次传代扩增，并取第4代细胞用于实验。对比CCK－8法在不同孵育时间及不同检测波长条件下吸光光度值的差异，研究CCK－8法检测牛膝醇提物诱导兔BMSCs佳检测时间及检测波长。结果：牛膝醇提物能明显诱导兔骨髓间充质干细胞增生，对诱导兔BMSCs软骨分化具有较强的可行性。 CCK－8法检测牛膝醇提物诱导兔BMSCs佳测试时间为加入CCK－8试剂孵育后的2小时，佳检测波长为450nm。适宜检测的细胞数量范围为2．5×103／ml～4×104／ml个。结论：CCK－8法在孵育2小时后及酶标仪450 nm波长下检测牛膝醇提物诱导兔BMSCs灵敏度高。
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牛膝醇提物对兔骨关节炎模型的疗效比较
目的 比较牛膝醇提物(AEAB)与硫酸氨基葡萄糖和双醋瑞因对于兔骨关节炎(OA)的疗效.方法 将35只实验兔采用随机区组分组法分为正常组、模型组、AEAB组、硫酸氨基葡萄糖组和双醋瑞因组,每组7只.石膏固定制动6周制备OA模型,造模后,分别以蒸馏水、AEAB、硫酸氨基葡萄糖及双醋瑞因灌胃,正常组不予处理,6周后处死实验兔,取软骨标本进行大体观察、Pelletier评分、Mankin评分,用免疫组化测定软骨Ⅱ型胶原蛋白含量,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清和关节液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的含量.结果 AEAB组、硫酸氨基葡萄糖组和双醋瑞因组Pelletier评分、Mankin评分、Ⅱ型胶原蛋白含量、血清和关节液中TNF-α、IL-1p以及MMP-3的含量分别与正常组、模型组比较,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01);AEAB组与硫酸氨基葡萄糖组及双醋瑞因组比较,上述指标差异均无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 AEAB可以促进兔OA模型的软骨修复,其疗效与硫酸氨基葡萄糖及双醋瑞因相当,具有较高的临床应用价值.
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牛膝醇提物对兔骨关节炎软骨细胞体外增殖及糖胺聚糖的干预作用
目的 观察牛膝醇提物对兔骨关节炎软骨细胞体外增殖及对糖胺聚糖(GAG)形成的影响.方法 骨关节炎造模成功后提取、分离兔骨关节炎软骨细胞,用甲苯胺蓝染色确定软骨细胞的存在,将软骨细胞接种于5组:空白对照组、牛膝醇提物低剂量组、牛膝醇提物中剂量组、牛膝醇提物高剂量组、经典软骨增殖组.倒置相差显微镜观察软骨细胞形态,用CCK-8法检测软骨细胞增殖率,免疫细胞学检测Ⅱ型胶原蛋白荧光表达,qRT-PCR检测软骨细胞标记基因Ⅱ型胶原mRNA表达水平,邻联甲苯胺(DMB)染色法检测细胞内GAG含量.结果 牛膝醇提物高、中、低剂量组与空白对照组比较Ⅱ型胶原蛋白荧光明显阳性表达;牛膝醇提物高、中剂量组与空白对照组比较软骨细胞标记基因Ⅱ型胶原mRNA明显增加(P＜0.05),其中牛膝醇提物高剂量组效果佳(P＜ 0.01),与经典软骨增殖组比较差异无统计学意义(P＞0.05);空白对照组GAG含量与经典软骨增殖组及不同剂量牛膝醇提物组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),其中牛膝醇提物高剂量组GAG多(P＜0.01),牛膝醇提物高剂量组与经典软骨增殖组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 牛膝醇提物中药含药血清可促进体外软骨细胞的增殖和蛋白合成,具体作用机制有待进一步探讨.
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牛膝醇提物透入治疗膝骨关节炎临床观察
膝骨关节炎是临床中的常见慢性病和多发病之一[1],其治疗手段不一,通常采取局部外治方法.为了摸索更为行之有效的治疗手段,使用中药透人仪将牛膝醇提物透人患者膝关节进行定向治疗,收到了良好的治疗效果,现报告如下.
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牛膝醇提物透入疗法对膝骨性关节炎的疗效观察
目的:验证牛膝醇提物透入疗法对膝骨性关节炎的临床疗效.方法:采用随机对照研究方式,选择70例单膝骨性关节炎患者,治疗组40例采用牛膝醇提物透药入治疗,对照组30例采用正清风痛宁注射液透入治疗,连续治疗3周,观察、比较两组治疗前后波士顿利兹骨关节炎(BLOKS)评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎(WOMAC)评分及膝关节负重与非负重疼痛积分.结果:牛膝醇提物能有效降低患者BLOKS评分中滑膜炎、关节积液积分、WOMAC评分及膝关节负重、非负重痛积分,且与治疗前对比差异均有统计学意义(P＜0.05);两组治疗后行组间对比,在关节积液、滑膜炎及膝关节非负重痛积分上两者差异无统计学意义(P＞0.05),而在WOMAC评分、膝关节负重痛积分上治疗组优于对照组,且差异有统计学意义(P＜0.05).结论:牛膝醇提物透入疗法可有效减轻膝骨性关节炎患者负重痛,降低WOMAC评分、BLOKS滑膜炎及关节积液积分,其中对WOMAC评分及膝关节负重痛积分的降低作用优于正清风痛宁组.
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牛膝醇提物诱导兔骨髓间充质干细胞软骨定向分化的实验研究
目的:观察牛膝醇提物诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨定分化的作用.方法:密度梯度离心联合骨髓贴壁法分离培养新西兰大白兔BMSCs,取P3代细胞随机分成5组(空白组、完全诱导组、牛膝醇提物低剂量组、牛膝醇提物中剂量组、牛膝醇提物高剂量组),连续诱导培养21d,倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫细胞学检测Ⅱ型胶原蛋白荧光表达,qRT-PCR检测软骨分化标记基因Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达情况,Western Blot检测Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达水平.结果:牛膝醇提物高、中、低剂量组与空白组相比Ⅱ型胶原蛋白荧光阳性表达明显;牛膝醇提物高、中剂量组与空白组相比软骨分化标记基因Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原明显增加(P＜0.05),Western Blot验证Sox9、蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达明显(P＜0.05),其中牛膝醇提物高剂量组效果佳(P＜0.01),与完全诱导组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:牛膝醇提物能够诱导兔BMSCs成软骨分化,其具体作用机制有待进一步研究.
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CCK-8法检测牛膝醇提物体外诱导兔BMSCs增殖活性的研究
目的:研究牛膝醇提物含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖的影响.方法:采用高、中、低剂量牛膝醇提物以及等体积生理盐水对SD级新西兰大白兔进行灌胃,从中提取含药血清,同时采用贴壁筛选法培养兔骨髓间充质干细胞,并以4种不同浓度的含药血清及胎牛血清分别干预第三代骨髓间充质干细胞.于干预后第3、6、9天分别3次采用CCK-8法测定细胞光密度值(OD),比较各组间的差异.结果:高剂量组牛膝醇提物含药血清刺激骨髓间充质干细胞增殖,并促进细胞分化,其OD均值与其他组相比较高,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:牛膝醇提物含药血清具有促进BM-SCs增殖作用,其中高剂量作用强.
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牛膝醇提物对佐剂性关节炎模型大鼠滑膜病理的影响
目的 观察牛膝醇提物(alcohol extractive of Achyranthis Bidentatae,AEAB)对佐剂性关节炎(AdjuvantArthritis,AA)大鼠的治疗作用及对关节滑膜病理的影响.方法 20只大鼠随机分为正常对照组、AA模型组、雷公藤多甙(Tripterygium Wilfordii Hook F,TWH)治疗组和AEAB治疗组.除正常组外,用氟氏完全佐剂(Freund's CompleteAdjuvant,FCA)0.2 ml诱发关节炎,以TwH为阳性对照药.用AEAB灌胃治疗,观察各组大鼠足跖关节肿胀度、关节炎症指数(AI)及滑膜病理变化.结果 TWH和AEAB治疗组关节肿胀度、AI均低于模型组;滑膜病理学较模型组明显改善.结论 AEAB能显著减轻AA大鼠关节肿胀,降低AI,能有效抑制关节滑膜增生.
