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鲨烯合文献资料
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滇重楼鲨烯合酶基因PpSQS的克隆及在大肠杆菌中的表达
目的:克隆滇重楼鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)基因(PpSQS),对该基因进行序列分析及原核表达.方法:采用同源克隆和RACE技术获得PpSQS的cDNA,并对其进行生物信息学分析；构建原核表达载体pET-30b(+)-PpSQS,在大肠杆菌Escherich coli BL21(DE3)中进行诱导表达.结果:PpSQS基因cDNA全长1498 bp,包含1个1212 bp的开放阅读框(ORF),可编码403个氨基酸；PpSQS理论标准分子质量为46.36 kDa,等电点为pI6.83；SDS-PAGE分析表明,经1 mmol·L-1IPTG诱导后,重组PpSQS蛋白在大肠杆菌中获得表达.结论:首次获得了滇重楼PpSQS基因cDNA全长序列,该基因编码产物具有植物SQS同源蛋白的典型特征,实现重组PpSQS在大肠杆菌中的表达.
