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原生质体分离文献资料
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滴水珠原生质体的分离纯化与植株再生
以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究.结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13％ CPW(细胞原生质体洗液)+1.0％纤维素酶+0.1％果胶酶,pH 6.0,适宜酶解温度为25 ～28℃,酶解时间为4h;滴水珠叶肉原生质体纯化以上浮法蔗糖梯度离心效果佳,以25％的蔗糖做梯度材料,500 r·min-1离心10 min;用于培养滴水珠原生质体的培养基为MS +0.5 mg·L-1 6-BA +0.25 mg·L-1NAA 13％甘露醇,培养3d有细胞分裂启动迹象,30 d左右形成愈伤组织,转移至MS +0.5 mg.L-16-BA+0.25 mg· L-1NAA固体培养基上增殖培养,并继代数次,5～6个月后愈伤组织可分化出芽并再生植株.
