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HPLC同时测定西藏栽培天麻中天麻素和8种核苷及碱基类成分
本实验建立了同时测定天麻药材中天麻素及8种核苷和碱基类成分的高效液相色谱法:Agilent Zorbax Bonus-RP(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇-(0.04％冰乙酸)水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温36℃,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,进样量20 μL.该方法分离度良好,天麻素、胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷和腺苷等的质量浓度在2.04 ～ 262.00,0.20 ～ 24.67,0.18～ 23.75,0.20～25.83,0.20～26.67,0.16～20.00,0.22 ～27.71,0.20～ 24.29,0.24～30.58 mg.L-1内,相关系数r在0.998 9～0.999 9,具有良好的线性.天麻素和8种核苷及碱基平均加标回收率在96.4％～ 99.6％,RSD均小于2.7％(n=6).测定了7个西藏栽培天麻药材中上述9种成分的含量.结果表明,7个天麻样品中天麻素的含量均高于2.0 mg·g-1,均含有较高的腺苷、鸟苷、尿苷和胞嘧啶,而胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤和胸腺嘧啶含量较低.该方法简便、准确,重复性好,适用于天麻药材中天麻素和腺苷等8种核苷及碱基类成分的含量测定.
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HPLC-DAD法对不同生长年限瓦布贝母10种核苷和碱基含量的测定
核苷和碱基具有多种生理生化活性,定量测定瓦布贝母的含量对其质量控制也很重要.本文建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器联用技术(HPLC-DAD)同时测定瓦布贝母鳞茎中6种核苷(鸟苷、胞嘧啶核苷、胸苷、腺苷、尿苷、肌苷)和4种碱基(胞嘧啶、尿嘧啶、胸腺嘧啶、腺嘌呤)成分含量的测定方法.采用Zorbax 300 (A) 300 Extend C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长为260 nm,以甲醇和水为流动相梯度洗脱,以1.0 mL/min的流速在30 min以内能够实现所选用的核苷和碱基实现完全分离.采用优化色谱条件后,所有10种待测成分具有良好的线性关系(R2≥0.9993),精密度(RSD≤3.715％),重复性(RSD≤3.748％),稳定性(RSD≤5.545％)和加样回收率(97.688％-102.923％).利用所建立的色谱方法成功地应用于不同生长年限瓦布贝母核苷和碱基的测定,并且首次分析了不同生长年限(1-7年)瓦布贝母的10种核苷和碱基的含量变化.本研究将有助于对瓦布贝母的栽培时间选择、质量控制、药理研究和临床应用.
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藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的含量分析
目的 建立藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中同时测定胞嘧啶、胞苷、尿嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿苷、胸腺嘧啶、鸟苷、胸苷和腺苷10种核苷类成分含量的HPLC-DAD方法,并对产自青海的6批次麻花秦艽花和6批次线叶龙胆花的这10种核苷成分进行含量测定和比较分析.方法 Bonus RP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.04％乙酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm,进样量20 μL.结果 10种核苷类成分线性关系、精密度、稳定性、重复性均符合含量测定方法学的要求,加样回收率为95.1％～98.5％.不同产地线叶龙胆花中10种核苷类成分总含量849.38～1 014.37 μg·g-1,麻花秦艽花为256.27～822.52μg·g-1.腺苷、鸟苷、尿苷和胞苷在麻花秦艽花和线叶龙胆花中的含量均较高,是其主要核苷成分,而尿嘧啶、鸟嘌呤和胸苷在2种样品中含量均较低.结论 该法简便实用、重复性好,适用于藏药麻花秦艽花和线叶龙胆花中10种核苷类成分的测定.青海不同产地2种藏药中10种核苷类成分的分析数据可为其质量控制和品质评价提供参考.
