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大蒜新素抑制人巨细胞病毒即刻早期抗原表达的实验研究
目的:通过研究大蒜新素对人巨细胞病毒即刻早期抗原(HCMV IEA)的抑制作用,探讨大蒜新素体外对HCMV感染的预防、阻断和治疗效应及其机制.方法:采用细胞形态观察和MTT比色法检测大蒜新素的细胞毒性.以流式细胞术定量检测和比较大蒜新素不同剂量, 不同处理时间(24,48,72,96 h)以及病毒感染不同阶段(病毒吸附前、吸附时和吸附后)应用大蒜新素时HCMV IEA表达水平变化.结果:人胚肺成纤维细胞对大蒜新素的大耐受浓度为9.60 mg·L-1.病毒吸附后持续用药可显著抑制HCMV IEA的表达,用药72 h HCMV IEA抑制率达89.3%;大蒜新素预处理细胞后感染病毒,HCMV IEA抑制率为28.6%;药物与病毒吸附同时应用,即刻早期抗原(IEA)抑制率仅为10.3%.结论:大蒜新素体外持续用药可显著抑制HCMV IEA的表达;其预防作用较弱;即时抑制效应不明显.大蒜新素对IEA表达的明显抑制可能是大蒜新素抗HCMV效应的主要作用机制之一.
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大蒜新素对HCMV主要即刻早期抗原IE72和IE86在人胚肺成纤维细胞中表达的影响
目的:研究大蒜新素对人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期抗原(IEAs)在人胚肺成纤维细胞中表达的影响.方法:建立HCMV AD169毒株(MOI为2.5和0.25)感染细胞模型和大蒜新素(IC50和MTC浓度)干预模型.用Western Blot 检测药物处理后感染细胞中HCMV主要IEAs(IE72和IE86)表达强度变化,并与相应浓度更昔洛韦(GCV)的作用效应相比较.结果:在高MOI和低MOI感染时,不同浓度大蒜新素均能使HCMV IE72和IE86表达强度明显下降,对IE86表达的抑制率为IE72的2倍左右.与GCV相比,大蒜新素对IE72的抑制率低于GCV,而对IE86的抑制效应高于GCV.结论:大蒜新素明显抑制HCMV IE72和IE86表达,对IE86的抑制尤为显著,这可能是大蒜新素抑制HCMV增殖的关键作用环节之一.
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小儿巨细胞病毒活动性感染的两种诊断方法比较
目的通过血清人巨细胞病毒(HCMV)IgM和尿快速培养HCMV检测临床标本的比较,进一步评价血清特异性IgM诊断活动性HCMV感染的价值.方法①ELISA法检测患儿血抗HCMV-IgG、IgM.②通过检测尿培养物中HCMV即刻早期抗原(IEA)快速诊断活动性HCMV感染.结果①119例尿培养阳性者,血抗HCMV-IgG均为阳性.②与尿快速培养法相比,血IgM的特异性和敏感性分别达到97.7%和69.7%;血IgM阳性数与尿快速培养阳性数比率在≤1个月、～1岁和～3岁组分别为45.8%、75.75和82.4%,表明IgM检测结果在各年龄组均有假阴性,其中尤以1个月以下婴儿多见.③2例3个月左右患儿血IgM阳性而尿培养阴性.11例随访患儿中,9例在结束更昔洛韦治疗后1个月复查,3例IgM迟于尿培养转阴,2例尿培养阴性而血IgM仍为阳性,表明IgM检测结果可有假阳性.结论血清特异性IgM检测可用于诊断活动性CMV感染,但其意义有一定局限性,应结合其他指标综合判断.
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人巨细胞病毒主要即刻早期抗原的致病机制与治疗
在细胞和分子水平对人巨细胞病毒致病机制的研究发现,主要即刻早期抗原(major immediate early antigen,MIEA)可促进人巨细胞病毒自身的产毒复制、影响宿主细胞基因表达、改变细胞生长周期导致细胞增殖或凋亡,并引发一系列炎症反应,是人巨细胞病毒致病的重要因素.抑制MIEA表达和对抗其功能的治疗显示出潜在优越性和良好的临床应用前景.
