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HMGB1对人肺成纤维细胞ERK1/2-NF-κB信号通路的影响及补阳还五汤含药血清的干预作用
目的:观察肺纤维化中诱导免疫损伤的高迁移率族蛋白Box-1(high mobility group Box-1 protein,HMGB1)刺激人肺成纤维细胞(HFL1)后细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinase1/2,ERK1/2),核转录因子-κB(nuclearfactor kappa B,NF-κB)信号通路的活化情况,以及补阳还五汤含药血清对HMGB1刺激HFL1后以上信号通路的干预作用.方法:采用含药血清药理学的实验方法,以5％,10％,15％,20％的补阳还五汤含药血清和空白血清来干预HMGB1诱导刺激的HFL1细胞.采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞总蛋白中ERK1/2,胞浆胞核中NF-κB p65蛋白的表达.结果:与空白组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK 1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P ＜0.05,P＜0.01);与20％空白血清预培养加HMGB1组比较,HMGB1刺激组诱导后ERK1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达均增高(P＜0.05);与HMGB1刺激组比较,补阳还五汤含药血清各组能够降低ERK1/2蛋白,胞浆和胞核中NF-κB p65蛋白及IL-1β含量的表达,其中15％和20％补阳还五汤含药血清组降低ERK1/2的表达(P＜0.05);胞浆10％补阳还五汤含药血清组和胞核20％补阳还五汤含药血清组降低NF-κB p65蛋白的表达(P＜0.05);15％补阳还五汤含药血清组降低IL-1β的含量(P＜0.05).结论:补阳还五汤含药血清在体外实验中,可抑制HMGB1引起的人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路的活化,减少IL-1β等炎症因子分泌.提示补阳还五汤可能通过调控人肺成纤维细胞中ERK1/2/NF-κB信号通路,防治肺纤维化的发生发展.
