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慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体融合基因表达及线粒体形态的影响
目的 研究慢性氟中毒对大鼠神经细胞线粒体融合基因Mfn1表达及线粒体形态的影响.方法 将60只1月龄清洁级SD大鼠以单纯随机法分为3组,每组20只,雌雄各半,分笼喂养.以饮水中加入氟剂量的不同,将大鼠分为对照组、低氟组、高氟组,染毒剂量分别为0、10和50 mg/L,分别在饲养3、6个月后,观察氟斑牙程度.采用透射扫描电子显微镜观察线粒体形态.用westernblotting和免疫组织化学方法检测线粒体融合基因Mfn1表达.结果 染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,3个月时低氟组以Ⅰ度氟斑牙为主(16只),高氟组发生Ⅰ度、Ⅱ度氟斑牙分别为11、9只；6个月时低氟组发生Ⅰ度、Ⅱ度、Ⅲ度氟斑牙分别为14、6、0只,高氟组为6、13、1只；对照组均未出现.低氟组、高氟组在3个月时尿氟分别为(3.30±1.18)、(5.10 ±0.35)mg/L(F =3.18,P ＜0.05)；6个月时分别为(4.16±1.39)、(5.70±1.70)mg/L(F=3.17,P ＜0.05).3个月时,对照组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体形态变化不明显,染氟组大鼠神经细胞线粒体均出现球状空泡状改变.Mfn1的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞数发生了改变,与对照组[(53.0±4.54)个]相比较,低氟组[(51.09±6.25)个]的改变无统计学意义(t=1.7,P＞0.05),而高氟组[(59.71 ±5.64)个]增加,差异有统计学意义(t=2.1,P＜0.05)；western-blotting法测得蛋白印迹平均吸光度值也具有相同的改变,与对照组(1.21±0.18)相比,低氟组(1.22±0.26)的改变无统计学意义(t=1.1,P＞0.05),高氟组(1.66 ±0.20)的水平升高,差异有统计学意义(t=2.1,P＜0.05).6个月时低氟组、高氟组大鼠大脑皮质神经细胞线粒体出现嵴消失、球状空泡状改变,对照组无明显改变.Mfn1的蛋白免疫组织化学强阳性表达神经细胞数发生了改变,与对照组[(36.43±4.04)个]相比较,低氟组[(20.05±4.55)个]、高氟组[(17.10±3.86)个]均降低,差异有统计学意义(t值分别为2.1,2.2,P值均＜0.05)；western-blotting法蛋白印迹平均吸光度值也有改变,与对照组(1.00 ±0.13)相比,低氟组(0.64±0.08)、高氟组(0.39±0.06)的水平降低,差异有统汁学意义(t值分别为2.2,2.2,P值均＜0.05).结论 摄入过量的氟可造成融合基因Mfn1表达改变和线粒体膜网络结构断裂,慢性氟中毒神经细胞损伤可能与线粒体融合功能障碍有关.
关键词： 氟中毒 牙 大鼠 线粒体融合基因Mfn1 神经系统
