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源水和氯化饮用水有机提取物文献资料
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源水和氯化饮用水中有机提取物对HepG2细胞DNA损伤的诱导作用及对gadd153基因表达的影响
背景与目的:研究源水和氯化饮用水有机提取物对DNA的损伤作用以及对gadd153启动子和mRNA表达的影响.材料与方法:应用彗星试验检测源水和氯化饮用水有机提取物对HepG2细胞的DNA损伤作用;构建含有gadd153启动子和荧光素酶报告基因的载体pGADD153-Luc,以检测荧光素酶活性(发光检测荧光素酶活性)反映gadd153启动子的活性,RT-PCR检测gadd153基因mRNA的表达.结果:彗星试验显示在10、100ml/ml培养基剂量组源水和氯化饮用水有机提取物处理24h后,OTM(Olive尾距)显著高于对照组(P＜0.01),并有良好的剂量反应关系(源水r=0.882,P＜0.05;氯化饮用水r=0.940,P＜0.05);氯化饮用水中有机提取物诱导OTM显著高于源水(P＜0.05);荧光素酶表达在源水和氯化饮用水有机提取物各剂量组均显著高于对照组(P＜0.01)并有良好的剂量反应关系(源水r=0.814,P＜0.05;氯化饮用水r=0.921,P＜0.05);相关分析表明荧光素酶活性与OTM呈正相关(源水r=0.980,P＜0.01;氯化饮用水r=0.995,P＜0.01);RT-PCR结果显示在100ml/ml培养基剂量组,源水和氯化饮用水中有机提取物诱导gadd153mRNA表达显著增加(P＜0.05),并与OTM有良好的相关性(源水r=0.864,P＜0.05;氯化饮用水r=0.897,P＜0.05).结论:源水和氯化饮用水有机提取物可诱导HepG2细胞DNA损伤,导致gadd153启动子区的激活,并进一步调控下游gadd153基因mRNA的表达.
