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抗人CD4 D1D2结构域多克隆抗体对HIV-1的抑制作用
目的 研究抗人CD4 D1D2结构域多克隆抗体对HIV-1的抑制作用.方法 经overlapping PCR构建人鼠嵌合型CD4质粒pcDNA3.1-mhD1D2m和pcDNA3.1-mhD2m,利用pcDNA3.1/V5-His-TOPO质粒载体的通用引物双向测序,测序结果用vector NTI 8.0软件与预期序列作比对,并通过假病毒感染实验检测其介导病毒感染能力,实验数据采用SPSS 11.5统计学软件进行x2检验.pcDNA3.1-mhD1D2m和pcD-NA3.1-mhD2m经DNA免疫BALB/c小鼠,所获多抗血清经假病毒中和实验检测其抗HIV-1中和能力,经FACS检测其与CD4抗原结合能力.结果 所构建人鼠嵌合型CD4质粒pcDNA3.1-mhD1D2m能够介导HIV-1假病毒感染.质粒pcDNA3.1-mhD1D2m免疫小鼠8周后所获得的多抗血清稀释100倍后,对HIV-1毒株抑制率为76%~95%.质粒pcDNA3.1-mhD2m免疫小鼠所获得的多抗血清则无明显的中和作用.FACS检测显示mhD1D2m多抗血清与TZM-bl细胞表面的CD4可以特异性结合.结论 抗人CD4D1D2结构域多克隆抗体对HIV-1具有较强的抑制作用,为AIDS治疗和疫苗研发提供实验依据.
关键词: 人类免疫缺陷病毒1型 CD4 D1D2结构域 中和抗体