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肌动蛋白结合蛋白细丝蛋白A参与肿瘤坏死因子α诱导的支持细胞屏障功能降低的研究
目的:探讨肌动蛋白结合蛋白细丝蛋白A(filamin A,FLNa)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNFα)调节支持(Sertoli)细胞屏障功能过程中发挥的作用.方法:体外分离培养20日龄大鼠睾丸支持细胞,用10 μg/L TNFα处理后测定跨上皮电阻(trans-epithelial electrical resistance,TER),反映屏障功能改变;Western blotting分析TNFα处理后FLNa表达水平变化;细胞免疫荧光或鬼笔环肽染色分别检测FLNa及微丝(F-actin)的定位改变;FLNa siRNA干扰后检测支持细胞屏障功能.结果:TNFα处理后TER值较对照组显著降低(P<0.01); Western blotting结果显示TNFα处理组FLNa水平明显下降(P<0.01);细胞形态学检测亦表明TNFα处理后FLNa及F-actin在支持细胞的分布有显著改变;TER测定结果表明FLNa经siRNA沉默后可降低血睾屏障(BTB)功能(P<0.01).结论:FLNa可通过调节F-actin在支持细胞中的排布参与TNFα引起的BTB功能降低.