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HCT116细胞系文献资料
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Stat3靶向RNA干扰重组体的构建及鉴定
目的设计针对Stat3的发夹样RNA干扰重组体,通过脂质体转染结肠癌细胞HCT116观察其干扰效果,为探索肿瘤基因治疗的新途径奠定基础.方法设计针对Stat3编码区的有短发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,克隆到载体Pavu6+27中构建重组体Pavu6+27-Stat3,再对重组质粒进行酶切鉴定、DNA测序分析.脂质体法转染重组体至大肠癌HCT116细胞株中,以空质粒(Pavu6+27)转染为对照;RT-PCR法观察Stat3基因表达改变.结果酶切鉴定和测序分析均提示Stat3靶向RNA干扰重组体的构建成功,Pavu6+27-Stat3转染后HCT116细胞Stat3基因表达较空载体Pavu6+27转染的对照组显著下降.结论 Stat3靶向RNA干扰重组体成功构建,并能有效抑制HCT116细胞中Stat3基因表达.本实验为下一步利用RNAi技术沉默肿瘤细胞中Stat3基因的表达,诱导肿瘤细胞凋亡或抑制其增生,为探索肿瘤基因治疗的新途径打下基础.
