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蛋白免疫印迹测定文献资料
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重组HIV抗原和多表位抗原的研究
目的研究重组HIV病毒系列抗原,以满足HIV各种抗体检测试剂研究的需要.方法从HIV-1/2不同抗原中精选出优势抗原片段,分别用PCR方法从编码全长HIV-1基因的pBH1OR2/HIV质粒中扩增出HIV-1/gp120、HIV-1/GP41及HIV-1/"M"优势抗原表位,用基因合成法,合成HIV-1/"0"和HIV-2/gp36基因,将获得的各基因片段插入到pBVIL1载体,使其在HB101中表达.利用载体pBVIL1具有使小分子肽基因间可方便连接的特点,选择优势抗原表位进行连接和嵌合表达.结果与结论所克隆的单片段及嵌合抗原均在大肠杆菌中获得了高效的表达,纯化的单片段及多表位嵌合抗原经用间接EIA法对HIV阴性和阳性血清测定,表明抗原已满足抗体检测试剂盒的要求.得到的单片段抗原可用于LIA测定,而多表位嵌合抗原,可用于EIA筛检试剂.
