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  • 脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A的克隆表达及血清学分析

    作者:陈航;方瑾

    目的 构建并表达功能性的脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A (NspA)的重组蛋白,并检测流行性脑脊髓膜炎(流脑)恢复期患者血清中的抗NspA抗体水平,探讨NspA作为新的流脑抗原疫苗的意义.方法 从流脑患者流行株中克隆NspA基因构建原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,GSTrap FF亲和层析纯化出具有生物活性的NspA融合蛋白.采用纯化得到的NspA融合蛋白检测流脑恢复期患者血清中的抗NspA抗体.结果 成功表达了功能性NspA蛋白,相对分子质量(Mr)为44 000.并用NspA融合蛋白检测到患者恢复期血清中存在有抗NspA抗体,且滴度为1:40时,阳性率为90%.结论 成功表达了NspA重组蛋白,并检测到自然感染流脑患者恢复期血清中的NspA抗体.

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