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靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制
目的 构建分别靶向ezrin(E)、radixin (R)、moesin (M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响.方法 根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响.结果 重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA、Lenti-control-siRNA构建成功.慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80％以上.Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达.流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平.结论 成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制.
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radixin 在乳腺癌组织中的表达及其与预后的相关性
目的：观察 radixin 蛋白表达与乳腺癌临床病理参数的相关性及临床意义。方法：收集散发性乳腺癌标本278例，乳腺纤维腺瘤组织46例，应用 SP 免疫组化法检测 radixin 蛋白的表达情况，并分析与乳腺癌患者临床病理参数的相关性。结果：乳腺癌中 radixin 蛋白表达阳性率为73.7%（205/278），乳腺纤维腺瘤中 ra-dixin 蛋白表达阳性率为32.6%（15/46），与乳腺纤维腺瘤组织比较，radixin 蛋白阳性表达率显著高于乳腺纤维腺瘤组织（P <0.0001）。在乳腺癌组织中，radixin 蛋白表达与患者 TNM 分期、HER -2表达正相关，在临床分期高、HER -2表达阳性的组织中，radixin 蛋白表达阳性率明显增加（P =0.023，P =0.007）。radixin 蛋白表达与患者年龄、绝经状态、淋巴结转移、肿瘤大小、p53蛋白表达均未见相关性。生存分析发现，radixin 蛋白表达与乳腺癌患者总体生存期无关，radixin 阳性表达的乳腺癌患者，RFS 时间明显缩短（P <0.05）。结论：乳腺癌组织中 radixin 蛋白高表达与患者临床分期、HER -2表达和临床预后相关。
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Ezrin,Radixin,Moesin与肿瘤相关的文献计量学研究
采用文献计量学的方法,以Medline为数据来源,对1976～2008年Ezrin,Radixin,Moesin与肿瘤相关的研究文献的年代、国家、期刊及其种类、主题等分布进行统计分析,反映相关研究热点,以期对科研人员起到一定借鉴作用.
