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核蛋白1(NUPR1)文献资料
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敲低核蛋白1(NUPR1)基因抑制人U266多发性骨髓瘤细胞增殖并促进其凋亡
目的 构建核蛋白1-短发夹RNA(NUPR1-shRNA)慢病毒载体定向敲低NUPR1基因,研究NUPR1基因下调对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖及凋亡的影响.方法 以正常浆细胞为对照,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测骨髓瘤U266细胞和RPMI8226细胞的NUPR1 mRNA水平.设计针对NUPR1基因的shRNA并包装慢病毒载体感染U266细胞,流式细胞术观察转染效率,qRT-PCR、Western blot法验证NUPR1基因干扰效果,CCK-8法及台盼(trypan)蓝染色检测细胞增殖,流式细胞术及Hoechst染色观察细胞凋亡.结果 与正常人浆细胞相比,U266、RPMI8226细胞NUPR1 mRNA水平较高;U266细胞慢病毒感染效率达80%,NUPR1-shRNA慢病毒载体构建成功.敲低NUPR1水平后,U266细胞增殖减弱,抑制率高达(58.71±1.64)%;与阴性对照组和空白对照组相比,敲低NUPR1水平后,U266细胞凋亡率明显增加.结论 敲低U266细胞NUPR1水平后,可明显抑制U266细胞增殖并促进其凋亡.
关键词: 核蛋白1(NUPR1) 多发性骨髓瘤 慢病毒 RNA干扰