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新型一体化纤维环-髓核双相支架的制备与评估
目的 用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建新型一体化纤维环-髓核双相支架,并进行理化检测,探讨其作为组织工程椎间盘支架的可行性. 方法 取猪股骨近端松质骨,塑形成外径10 mm、内径5 mm、厚3 mm的骨环,经脱脂、脱钙、脱细胞处理制备成纤维环相支架；取猪尾髓核组织,Triton X-100和脱氧胆酸联合脱细胞后粉碎、离心,制备脱细胞髓核基质；将制备的脱细胞髓核基质注入纤维环相支架中央,冷冻干燥,联合应用紫外照射和碳化二亚胺进行交联,制备一体化纤维环-髓核双相支架.通过大体观察、HE染色、扫描电镜观察支架结构；测定支架的孔隙率、吸水率、压缩弹性模量；MTT法检测25％、50％、100％支架浸提液对新西兰大白兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)增殖的影响；将ADSCs接种到支架上,活/死细胞染色观察细胞在支架上的活性. 结果 大体观察支架呈乳白色；HE染色可见支架均质红染,无细胞成分残留；扫描电镜可见外层纤维环相支架孔径大小均匀一致,孔隙相互贯通,中央脱细胞髓核基质微丝相互连接,形成均匀网状结构,交界处连接紧密.纤维环相支架孔径为(343.00±88.25)μm,一体化纤维环-髓核双相支架孔隙率为82.98％±7.02％、吸水率为621.53％±53.31％,压缩弹性模量为(89.07±8.73)kPa.经MTT测定支架浸提液对ADSCs增殖无影响；活/死细胞染色可见细胞在支架上生长良好,无死细胞. 结论 用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建的一体化纤维环-髓核双相支架具有合适的孔径和孔隙率且无毒,力学性能与人正常椎间盘接近,是构建组织工程椎间盘的理想支架载体.
