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KLD-12文献资料
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KLD-12多肽/重组人BMP-2凝胶诱导兔BMSCs成骨活性的实验研究
目的 探讨KLD-12多肽复合重组人BMP-2(recombinant human BMP-2,rhBMP-2)诱导兔BMSCs成骨活性的影响.方法 取3月龄新西兰大白兔骨髓,采用密度梯度法分离培养BMSCs.取第3代BMSCs分别采用KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶三维培养(实验组)和KLD-12多肽凝胶培养(对照组).培养7d倒置相差显微镜下观察实验组细胞在凝胶内的形态;3、7、10、14、21 d检测两组细胞培养基中ALP及骨钙蛋白含量;培养14 d两组行Ⅰ型胶原免疫荧光染色观察,实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原和骨钙蛋白基因相对表达量.结果 倒置相差显微镜下观察,培养7d实验组及对照组凝胶内BMSCs呈圆形,分布均匀.两组培养3、7d时ALP表达量及骨钙蛋白含量比较差异无统计学意义(P＞0.05),10～21 d实验组以上指标均明显高于对照组(P＜0.05).培养14 d,激光共聚焦显微镜观察示,实验组Ⅰ型胶原免疫荧光染色阳性,且荧光强度较对照组高;实时荧光定量PCR检测实验组Ⅰ型胶原、骨钙蛋白基因相对表达量均显著高于对照组,比较差异有统计学意义(t=15.902,P=0.000;t=12.998,P=0.000).结论 BMSCs在KLD-12多肽内正常生长并增殖,KLD-12多肽/rhBMP-2凝胶诱导BMSCs向成骨细胞分化的生物活性良好.
