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甘草酸二铵对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB表达及神经元凋亡影响的研究
目的 探讨甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后NF-κB的表达及神经元凋亡的影响.方法 取健康雄性SD大鼠48只,体重220～270g,随机分为实验组和对照组,每组24只.实验组于缺血开始前10 min舌下静脉注射DG(20 mg/kg),对照组注射等量生理盐水.夹闭左右肾动脉之间腹主动脉制备脊髓缺血再灌注损伤模型.两组于缺血再灌注3、24、72、168 h取腰段脊髓组织,切片,行HE染色、免疫组织化学染色观察及TUNEL法凋亡细胞检测,并进行相关性分析.结果 HE染色示对照组缺血再灌注3 h时,可见脊髓组织水肿,神经细胞形态基本正常;24 h和72 h时组织病理改变进一步加重;168 h时灰质前角中大量空泡形成,尚残存多个结构清楚的运动神经元.实验组各时间点明显好于对照组.免疫组织化学染色示两组缺血再灌注3 h表达NF-κB p65增强,24h达高峰,随后缓慢下降.实验组缺血再灌注各时间点吸光度(A)值分别为0.3060±0.0244、0.3964±0.0227、0.2966±0.0211和0.2679±0.0153;对照组分别为0.3611±0.0177、0.4966±0.0201、0.3563±0.0210和0.3014±0.0181(P＜0.05).DG对各时间点NF-κB p65表达的抑制率分别是15.40%、20.17%、19.28%和11.11%.细胞凋亡检测示两组于缺血再灌注后神经元凋亡表达增强.实验组各时间点A值分别为0.1710±0.0291、0.1755±0.0311、0.1751±0.0279和0.1832±0.0237;对照组分别为0.2368±0.0636、0.2412±0.042 6、0.2015±0.049 8和0.2501±0.0484(P＜0.05).DG各时间点对神经元凋亡表达的抑制率分别为27.79%、27.23%、13,08%和26.74%.实验组和对照组NF-κB表达和神经元凋亡表达成正相关(r=0.838,P＜0.01).结论 脊髓缺血再灌注可导致NF-κB表达及凋亡神经元增多,DG可抑制脊髓神经元NF.v,B的表达,减少神经元凋亡.
