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BPI23-haFGF融合基因文献资料
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BPI23-haFGF融合蛋白在毕赤酵母X-33中的分泌表达及活性鉴定
将BPI23-haFGF融合基因克隆到酵母表达载体pPICZαA中,构建出含BPI23-haFGF融合基因的重组质粒pPICZαA-BPI23-haFGF.通过电击将经Sac Ⅰ酶切线性化的pPICZαA-BPI23-haFGF质粒转化到巴斯德毕赤酵母X-33菌中,并通过抗性与表型筛选、PCR鉴定获得高效的工程菌.收集表达上清进行SDS-PAGE 和Western blot分析,结果表明,在43 KD有与预期大小相符的条带,占上清总蛋白的50%以上.亲和层析纯化后的融合蛋白BPI23-haFGF纯度约90%,体外活性实验结果,纯化产物具有杀死革兰氏阴性菌及促进NIH3T3细胞增殖的双重功能.
关键词： BPI23-haFGF融合基因 毕赤酵母X-33 分泌表达 活性鉴定
