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金刚烷胺和联苯双酯抗乙型肝炎病毒作用的动物实验研究
为了对金刚烷胺(AM)和联苯双酯(DDB)抗乙肝病毒(HBV)的作用进行动物实验研究,采用高压注射体内转染法建立HBV复制小鼠模型,对模型小鼠给药3d后处死.用Southern杂交检测小鼠肝脏HBV DNA复制中间体;ELISA检测血清中HBeAg和HBsAg.给予AM和二种药物联合处理后,小鼠体内HBV DNA复制中间体和HBeAg、HBsAg的水平较对照组明显降低,而该两组相比无明显差异.仅给予DDB的小鼠肝脏HBV DNA复制中间体和血清抗原水平与对照组相比无明显差异.因此,AM能够抑制小鼠体内HBV的复制、表达,而连续3d给予DDB对小鼠体内HBV无抑制作用.
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利用高压注射体内转染法实现HBsAg在小鼠肝脏中的高效表达
目的:观察能否应用高压注射体内转染法实现外源DNA在肝脏中高效表达,为嗜肝病毒分子生物学研究奠定方法学基础.方法:将大容量乙肝病毒表面抗原表达质粒pVAX1/S DNA溶液,通过尾静脉快速注射入小鼠体内,用免疫组化检测小鼠心、肺、肝、脾、肾组织中HBsAg的表达情况.结果:经小鼠尾静脉高压注射pVAX1/S质粒DNA后,HBsAg主要在肝脏表达;且高压注射组明显强于缓慢注射组;高压注射5μg pVAX1/S质粒DNA后8小时,在肝脏观察到较强的HBsAg表达.结论:通过尾静脉高压注射,能实现HBsAg主要在肝脏高效表达.