您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
人IL-18结合蛋白A文献资料
-
人IL-18结合蛋白AcDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达
目的克隆人IL-18结合蛋白A(hIIL-18 BPa)的cDNA,观察其在COS-7中的表达.方法采用RT-PCR自人白血病细胞株jurkat中获得hIL-18 BPa的cDNA,将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中.脂质体介导法将其转染C05-7细胞,72 h后收集上清纯化,用BCA法测定hIL-18 BPa的含量,用ELISA法测定其活性.结果获得的IL-18 BPa的cDNA序列与gene bank登录的cDNA序列一致.上清液中hIL-18 BPa含量为1.4 mg/L,并具有良好的生物学活性.结论成功克隆hIL-18 BPa基因,并实现了在COS-7细胞中的瞬时表达,为研究其活性奠定了基础.
关键词： 人IL-18结合蛋白A 瞬时表达 COS-7细胞 -
人IL-18结合蛋白A在CHO细胞中表达的研究
目的克隆人IL-18结合蛋白A(hIL-18BPa)的cDNA,构建真核表达载体及其在CHO细胞中的表达.方法采用RT-PCR,自人白血病血细胞株Jurkat中获得hIL-18BPa的cDNA.将其克隆至T-vector中,经测序确证后,将该基因定向插入真核表达载体pcDNA3.1中.以脂质体介导法,将其转染CHO细胞,用G418筛选抗性克隆,ELISA法测定其生物学活性.结果获得的IL-18BPa的cDNA序列与GeneBank登录的cDNA序列一致.将hIL-18BPa插入载体pcDNA3.1后,成功地构建稳定表达的载体.转染CHO细胞后,获得可稳定表达hIL-18BPa的基因工程细胞株.经纯化后,证明具有良好的生物学活性.结论成功地克隆hIL-18BPa基因,并实现了在CHO细胞中的稳定表达,为研究其生物学活性奠定了基础.
关键词： 人IL-18结合蛋白A 基因表达 CHO细胞
