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IL-17A抗体对成纤维细胞增殖及分泌羟脯氨酸的影响
目的 观察IL-17A抗体对成纤维细胞增殖及分泌羟脯氨酸的影响.方法 将清洁级雌性Wistar大鼠分为生理盐水(normal saline,NS)组和博来霉素(bleomycin,BLM)组.NS组、BLM组大鼠分别于气管内灌注NS和BLM,并于气管内灌注后第7天心脏采血处死,右肺行灌洗,并分离、纯化肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM),将其培养24 h后分别取2组AM培养上清;左肺行病理切片及HE染色.将大鼠成纤维细胞(208F细胞)分为对照组、模型组、抗体组(A组、B组、C组)培养,各组培养基分别为:NS组AM培养上清、BLM组AM培养上清、BLM组AM培养上清+不同质量浓度IL-17A抗体(0.5、1、2μg/L),分别于第24、48和72小时用CCK-8检测208F细胞增殖.208F细胞按上述方法分为5组培养24 h后,应用酶联免疫分析(ELISA)检测208F培养上清中的羟脯氨酸含量.结果 BLM组大鼠肺部炎症明显高于NS组.208F细胞增殖结果显示:模型组和抗体组各组在各个时间点均高于对照组(P＜0.05);各个抗体组在各个时间点均低于模型组(P＜0.05);抗体A组在各个时间点均高于其他两抗体组(P＜0.05),抗体B组和抗体C组在各个时间点均无明显差异(P＞0.05).208F细胞培养上清中羟脯氨酸结果显示:模型组和各个抗体组均高于对照组(P＜0.05);各个抗体组均低于模型组(P＜ 0.05);抗体A组高于其他两抗体组(P＜0.05),抗体B组和抗体C组无明显差异(P＞0.05).结论 在体外IL-17A抗体可减轻肺纤维化大鼠AM诱导的成纤维细胞过度增殖和胶原蛋白过度表达.
