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磷脂酶cζ文献资料
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PLCζ在INS-1细胞中的表达及功能初步分析
目的:探讨磷脂酶Cζ(Phospholipase Cζ,PLCζ)在INS-1细胞中的表达,并初步分析PLCζ对葡萄糖刺激胰岛素分泌(Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS)的影响.方法:(1)设计6类PLC的引物,RT-PCR检测INS-1细胞中各类PLC的表达.(2)设定葡萄糖浓度梯度:10、20、40、80、100 mmol/L,分别刺激INS-1细胞40 min,ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素的含量,确定适葡萄糖刺激浓度,设定时间梯度:20、40、60、80、120min,以适葡萄糖浓度刺激后ELISA检测细胞培养上清液中胰岛素含量,确定适刺激时间.(3)用适葡萄糖浓度刺激INS-1细胞适当时间后,半定量RT-PCR、Western Blot检测PLCζ 的表达变化.结果:(1)6类PLC中PLCβ、PLCγ、PLCδ、PLCζ、PLCη在INS-1细胞中表达,PLCε不表达.(2)用40 mmol/L 葡萄糖刺激60 min,INS-1细胞的胰岛素分泌量大,半定量RT-PCR、Western Blot检测葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达上调.结论:(1)先前发现在精子中特异表达的PLCζ在INS-1细胞中有表达.(2)葡萄糖刺激INS-1细胞后PLCζ的表达明显增加,提示PLCζ可能参与GSIS信号转导.
关键词： 磷脂酶cζ 表达 RT-PCR 葡萄糖刺激胰岛素分泌
