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天冬氨酸蛋白酶抑制剂文献资料
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十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂的克隆与表达
目的 克隆并表达十二指肠钩虫天冬氨酸蛋白酶抑制剂(Ad-API-1). 方法 根据犬钩虫及锡兰钩虫API保守序列设计引物,RT-PCR扩增获得Ad-API-1完整阅读框序列,并将Ad_API-1成熟肽编码序列克隆、连接到原核表达栽体pET32a,以构建重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导表达,用Ni亲和层析进行纯化. 结果 成功克隆获得Ad-API-1完整阅读框序列;构建了pgl32a/Ad-API-1重组质粒.Ad-API-1在大肠杆菌中得到了高效表达. 结论 成功克隆并表达Ad-API-1,为进一步研究Ad-API-1的功能,探讨其作为血清学诊断抗原或保护性疫苗奠定了基础.
关键词： 十二指肠钩虫 天冬氨酸蛋白酶抑制剂 克隆 表达
