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人肺纤维母细胞文献资料
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转染survivin对HLF细胞增殖及凋亡的影响
[目的]探讨survivin基因表达对人肺纤维母细胞(human lung fibroblast,HLF)增殖、凋亡的影响.[方法]构建survivin基因真核表达质粒pcDNA3.1/SVN;利用脂质体转染法将其转入不表达survivin mRNA的HLF细胞系.连续培养10周,筛选出稳定表达的阳性克隆(HLF/SVN)及转空质粒对照(HLF/K).用RT-PCR、免疫组化、Western blot检测细胞中survivin、bcl-2和caspase3 mRNA表达:通过观察细胞生长曲线、细胞凋亡指数,探讨转染survivin基因对HLF细胞生长、凋亡的影响.[结果]转染pcDNA3.1/SVN后,在4、6、8和10周HLF/SVN细胞查见survivin mRNA表达;免疫组化和Western blot见HLF/SVN细胞survivin阳性表达;转染后caspase3 mRNA受到抑制,表达减弱或消失.HLF/SVN细胞凋亡指数(03%、1.0%、1.5%)皆低于HLF(0.9%、4.3%、2.1%)及HLF/K(0.8%、1.4%、2.8%).细胞生长曲线示HLF/SVN细胞生长快于HLF和HLF/K,差异有统计学意义(P<0.05).[结论]survivin基因能促进HLF细胞生长,可能通过抑制凋亡和促进细胞分裂而发挥作用.
关键词： Survivin蛋白 人肺纤维母细胞 转染 pcDNA3.1
