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多引物人工一步合成基因技术文献资料
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降钙素原的克隆、表达及多抗制备
目的 合成降钙素原的全长基因,表达出降钙素原的融合蛋白并制备多抗,为降钙素原(PCT)的功能研究及单抗制备提供有力的实验基础.方法 采用多引物人工一步合成基因技术合成降钙素原的全长基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1表达出重组蛋白,将初步纯化的蛋白免疫小鼠制备多抗并进行Westernblot鉴定.结果 成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,Western blot证实所制备的PCT多抗可与所获得的融合蛋白和病人血清发生特异性反应.结论 成功表达降钙素原重组蛋白并制备其多抗,为明确降钙素原来源和病理生理作用的研究奠定了基础,以及为制备其单克隆抗体提供实验材料.
关键词： 降钙素原 融合蛋白 多引物人工一步合成基因技术 克隆 -
降钙素原的克隆表达及鉴定
目的 研究降钙素原的克隆表达及鉴定,为PCT的功能研究及单抗制备提供有力的实验基础.方法 采用多引物人工一步合成基因技术合成降钙素原的全长基因,克隆至原核表达载体PET-20B表达出重组蛋白,将此表达的产物进行Western blot鉴定.结果 成功表达降钙素原重组蛋白,Western blot 成功鉴定.结论 成功表达降钙素原重组蛋白并成功鉴定,为明确降钙素原来源和病理生理作用的研究奠定了基础, 为制备其单克隆抗体提供实验材料.
