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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2文献资料
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高分辨率熔解曲线分析技术检测-2基因点突变方法的建立及评价
目的 建立高分辨率熔解曲线(HRM)分析技术检测人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2(-2)基因g.21370(G>T)位点单核苷酸多态性(SNP)的方法并进行评价.方法 通过测序获得基因g.21370(G>T)位点3种不同基因型对照品,并用其建立HRM技术检测-2基因点突变方法.利用60份待测DNA样品对建立的HRM方法的准确性、重复性及稳定性进行评价.结果 建立的-2基因HRM分析方法扩增反应正常,G/G、G/T、T/T 3种基因型区分明显,扩增产物Melt曲线良好,无非特异性产物出现;与基因序列测定结果对比显示准确性良好;对野生型和突变型标本3次重复检测结果显示,Tm值变异系数为0.017和0.023;χ2检验结果表明,本研究选取的随机体检人群-2基因g.21370(G>T)位点基因型频率分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡.结论 建立的-2基因g.21370(G>T)位点HRM检测方法准确性高、重复性及稳定性良好,为下一步临床分析-2基因SNP提供一定的技术支持.
