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  • 抗Caspase-7锤头状核酶在原代肝细胞内的切割活性研究

    作者:张(韦华);谢青;姜山;俞红;臧国庆

    目的 研究抗Caspase-7锤头状核酶在原代肝细胞内对靶基因的切割活性.方法 构建含抗Cas-pase-7锤头状核酶的真核表达质粒pRz333.将其转染原代肝细胞后,用TNF-α和放线菌素D上调细胞内Caspase-7mRNA的表达.RT-PCK和免疫印迹法检测Caspase-7 mRNA和蛋白酶原的表达.用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率.结果 与诱导组相比,核酶组肝细胞内Caspase-7 mRNA的表达降低了29.34%;Caspase-7蛋白酶原含量下降了32.12%;细胞凋亡率减低了11.75%.结论 抗Caspase-7锤头状核酶在原代肝细胞内能够特异性切割靶基因,使目的 基因的mRNA和蛋白质表达下调,并能够减少肝细胞凋亡.

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