首页 > 文献资料
-
siRNA抑制THOC1基因表达对胰腺癌Panc-1细胞生物学行为的影响
目的 采用RNA干扰技术下调THOC1基因在胰腺癌细胞Panc-1中的表达,探讨THOC1表达下调对Panc-1细胞生物学行为的影响,以期探讨THOC1基因的功能.方法 构建靶向THOC1基因siRNA慢病毒载体(重组慢病毒中有绿色荧光蛋A真核表达框),感染Panc-1细胞(THOC1 siRNA组),并设立慢病毒载体对照组(Control-siRNA组)及空白对照组.荧光显微镜下观察并计算感染效率,Western印迹检测各组细胞中THOC1蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术测定细胞周期,Transwell小室实验检测细胞体外迁移侵袭能力.结果 与Control-siRNA组及空白对照组比较,THOC1 siRNA组的THOC1蛋白表达受到抑制,细胞增殖能力明显减弱(P＜0.01),G1/G2期细胞数增多和S期细胞数减少表明细胞周期受阻、细胞体外迁移和侵袭能力显著减弱(P＜0.01).结论 THOC1基因具有促进胰腺癌细胞Panc-1细胞的增殖和体外迁移侵袭的作用.
-
siRNA沉默胰腺癌Panc-1中THOC1对吉西他滨敏感性的影响
目的 观察小干扰RNA(siRNA)沉默THOC1对胰腺癌Panc-1细胞吉西他滨敏感性的影响. 方法 将THOC1 siRNA通过瞬时转染于胰腺癌Panc-1细胞,使用qPCR和Western blot实验检验转染效果,通过MTT实验和平板克隆实验观察Panc-1细胞对吉西他滨敏感性的变化,并且通过Hoechst 33258染料核染色后观察Panc-1细胞在吉西他滨作用下凋亡反应的差异.结果 成功转染THOC1 siRNA并有效抑制了THOC1的表达.转染THOC1 siRNA后Panc-1细胞对吉西他滨的药物敏感性明显增加(P＜0.01),在吉西他滨作用下凋亡细胞增多(P＜0.01).结论 通过siRNA抑制THOC1的表达后可以增加胰腺癌Panc-1细胞对吉西他滨的药物敏感性.
