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线粒体膜通透性转移孔文献资料
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糖原合成酶激酶3β介导心房钠尿肽对H9c2心肌细胞线粒体保护作用的研究
目的 探讨心房钠尿肽(ANP)对H9c2心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制.方法 采用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)荧光染料和激光共聚焦显微镜成像技术测定H9c2心肌细胞TMRE荧光强度的变化,即线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放程度.利用双氧水H2O2诱导H9c2心肌细胞线粒体mPTP的开放,预处理不同浓度的ANP后,观察ANP对mPTP开放的影响;同时利用Western blot检测H9c2心肌细胞的糖原合成酶激酶3β(GSK-3 β Ser9)磷酸化程度,即失活程度.利用激活型GSK-3 β质粒转染的H9c2心肌细胞(GSK-3 β-S9A-HA),来观察ANP对GSK-3 β-S9A-HA的线粒体mPTP开放程度.结果 与对照组(600μmol/L H2O2)比较,0.01、0.10、1.00和10.00 nmol/L ANP明显抑制H2O2对TMRE荧光强度的衰减效应(P＜0.05),其中1.00 nmol/L的ANP效应强.Western blot检测结果显示,0.01、0.10、1.00和10.00 nmol/L ANP明显增强GSK-3β Ser9的磷酸化(P＜0.05),即抑制GSK-3β的活性利用GSK-3β-S9A-HA后发现,ANP(1.0 nmol/L)不能抑制mPTP开放(与H9c2比较P＜0.05).结论 ANP通过调节GSK-3β活性来抑制H9c2心肌细胞mPTP的开放,从而保护H9c2心肌细胞的缺血再灌注损伤.
关键词： 心房钠尿肽 缺血再灌注 线粒体膜通透性转移孔 糖原合成酶激酶3β
