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免疫细胞化学和免疫印迹法文献资料
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凝血酶对血管内皮细胞核因子κB活化及基质金属蛋白酶2表达的影响
研究凝血酶是否通过激活核因子κB信号传导途径,诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞上调基质金属蛋白酶2表达,以及重组水蛭素对该途径是否有拮抗作用.体外培养人脐静脉内皮细胞,用免疫细胞化学和免疫印迹法分析核因子κB活化时由细胞浆至细胞核的动态改变,用逆转录聚合酶链反应法评价基质金属蛋白酶2 mRNA的表达.结果发现,凝血酶诱导脐静脉内皮细胞后15 min即有核因子κB的活化,30 min核内大量活化;凝血酶诱导脐静脉内皮细胞表达基质金属蛋白酶2 mRNA,较高表达在6~24 h.重组水蛭素可以抑制该过程.结果提示,通过参与核因子κB激活传导信号途径,凝血酶诱导脐静脉内皮细胞上调基质金属蛋白酶2 mRNA表达.水蛭素可以有效地抑制凝血酶诱导脐静脉内皮细胞上调基质金属蛋白酶2表达,但不能完全抑制核因子κB的活化.