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RhoA、Rac1及Cdc42在胆道闭锁肝纤维化中的作用
目的 研究胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝组织中RhoA、Rac1及Cdc42表达情况与肝纤维化的关系,探讨其在BA发病中可能的作用机制.方法 选取胆管扩张症患儿肝组织(胆扩组)15例,BA患儿肝组织(BA组)15例,BA发展至肝硬化接受肝移植患儿自体肝活检组织(移植组)10例,采用HE观察肝组织标本纤维化程度;免疫组化染色检测RhoA、Rac1及Cdc42在肝组织中的蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测肝组织中RhoA、Rac1及Cdc42基因表达情况.结果 ①HE染色:胆扩组偶见少许纤维组织增生;BA组汇管区增宽,纤维组织增生、桥接纤维化现象普遍,可见假小叶形成;移植组假小叶显著;②免疫组化:胆扩组RhoA、Rac1及Cdc42均表达为弱阳性,BA组及肝移植组患儿RhoA、Rac1及Cdc42蛋白在肝细胞、汇管区胆管上皮细胞中均为阳性表达;③半定量分析:RhoA(0.1419±0.0683、0.2203±0.0476和0.2295±0.0623),Rac1(0.1587±0.0072、0.1970±0.0242和0.1993±0.0270)和Cdc42 (0.887±0.0270、0.1397±0.0360和0.1519±0.0168)在三组蛋白表达水平之间比较差异有统计学意义(P＜0.05),且三组中BA组及肝移植组RhoA、Rac1及Cdc42蛋白表达水平明显高于胆扩组(P＜0.05);移植组RhoA、Rac1及Cdc42蛋白含量与BA组,表达差异无统计学意义(P＞0.05);④qRT-PCR:RhoA[0.3350(0.2525～0.6350)、1.5200(1.4375～2.1700)和1.9350 (1.7950～2.3925)],Rac1 [0.2800 (0.1450～0.3025)、0.8200(0.7275～0.9300)和0.8000(0.7725～0.9825)],Cdc42[0.5950(0.4375～0.7125)、1.8950(1.8675～2.1925)和1.9900(1.8675～2.2050)],三组中mRNA表达水平比较差异有统计学意义(P＜0.017),同时在这三组中,BA组及肝移植组RhoA、Rac1及Cdc42含量表达明显高于胆扩组(P＜0.017).结论 RhoA、Rac1及Cdc42在BA患儿肝组织呈高水平表达,表明其可能参与并促进BA肝纤维进程.
