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B细胞活化因子信号对小鼠肾小管上皮细胞生长特性的影响
目的 观察B细胞活化因子(BAFF)及其受体在原代小鼠肾小管上皮细胞(RTECs)的表达及对其生长特性的影响.方法 酶消化法分离培养原代小鼠RTECs;以500 U/ml干扰素(IFN)-γ刺激原代小鼠RTECs,48 h后流式细胞术(FCM)检测RTECs细胞膜上BAFF及BAFF受体(BAFF-R)的表达;以重组BAFF蛋白和/或阻断性B细胞活化因子受体-Fc融合蛋白(BAFF-R-Fc)刺激RTECs,48 h后以荧光素钠转运实验检测RTECs离子转运功能、细胞免疫荧光法检测角蛋白-18(CK-18)的表达、四唑氮化合物(MTS)法检测RTECs增殖、FCM法检测细胞凋亡.结果 小鼠RTECs经IFN-γ作用后,BAFF-R表达水平较未受IFN-γ刺激组显著上调(4 166.250±913.914比3 602.750±875.584,t=4.124,P=0.026);荧光素钠转运实验结果显示,BAFF刺激组的平均吸光度(A)值为0.011±0.003,显著低于BAFF-R-Fc± BAFF组(0.020 ±0.007)和对照组(0.016±0.006),差异均有统计学意义(t=-3.437,P=0.041;t=-3.572,P=0.038);免疫荧光结果显示,BAFF刺激组平均A值为0.032±0.005,显著低于BAFF-R-Fc+BAFF组(0.043±0.007)和对照组(0.041±0.008),差异均有统计学意义(t=-8.006,P =0.015;t=-4.603,P=0.044);5、20 ng/ml BAFF刺激组细胞增殖A值分别为(1.532±0.058)、(1.509±0.056)显著高于对照组(1.473±0.045),差异均有统计学意义(t=5.636,P=0.030;t=5.765,P=0.029)且5 ng/ml BAFF刺激组显著高于BAFF-R-Fc+ BAFF组(1.477±0.050),差异有统计学意义(t=5.085,P=0.037);BAFF刺激组细胞凋亡率为(39.850±8.544)％,显著低于BAFF-R-Fc+ BAFF组[(42.950±8.330)％]和对照组[(44.467±7.642)％],差异均有统计学意义(t=-3.399,P=0.019;t=-3.020,P=0.029).结论 BAFF/BAFF-R信号增强能促进RTECs增殖,但使其上皮细胞特性和离子转运功能显著下降.
